본 연구과제의 목표는 파킨슨병에 치료 효과를 나타내는 약물의 혈액-뇌 관문 투과성을 증진시켜 효과적으로 뇌 내로 전달할 수 있는 약물 전달 시스템을 개발하는 것이다. 이를 위해서 혈액-뇌 관문에 특이적인 단일클론 항체 (monoclonal antiobody)인 OX26과 pegylated 나노리포좀을 결합하여 파킨슨병 치료약물 (도파민)을 뇌로 수송하고자 하였다.
우선 도파민을 봉입한 pegylated 나노리포좀을 만들기 위해 POPC, DOTAP, DSPE-PEG2000을 5 : 2 : 1의 비율로 사용하여 지질막을 형성하여 freeze-thaw method를 사용하여 도파민을 봉입시켰다. 이 때 도파민의 리포좀 내 봉입 수득률은 약 35%를 나타내었다. Extrusion법을 사용하여 직경이 100 nm 이하인 리포좀을 얻고자 하였으며, 이 때 도파민을 봉입한 pegylated 나노리포좀은 평균 직경은 46 ± 4 nm을 나타내었다. 형성된 리포좀은 z-potential이 6 ± 1 mV로써 전기적으로 중성에 가까운 성질을 나타내었다. 제조된 도파민을 봉입한 PEG pegylated 나노리포좀(DA-PL)은 실온의 식염수에서 72시간까지 처음의 약 80%의 안정성을 유지하였고, 37℃의 rat plasma에서는 24시간까지 처음의 약 70%, 72시간까지 약 50%의 안정성을 나타내었다. DA-PL의 제조와 동시에 혈액-뇌 관문에 특이적인 단일클론 항체 (monoclonal antiobody)인 OX26를 chloamine T를 사용하여 iodination을 실시하였고 Traut's reagent를 사용하여 thiolation을 하였다. Thiolated OX26과 DA-PL을 일정 시간 충분히 conjugation시키고 gel filtration 크로마토그래피법을 사용하여 분리 정제하여 최종적으로 도파민을 봉입한 OX26-PEG pegylated 나노리포좀(DA-PIL)을 제조하였다.

 

(후략)